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编译服务: 人类遗传资源和特殊生物资源流失 编译者: yanyf@mail.las.ac.cn 发布时间: May 22, 2020 点击量: 233

CRISPR-Cas适应性免疫系统保护细菌和古生菌免受其入侵的遗传寄生虫,包括噬菌体/病毒和质粒。针对这种免疫反应,许多噬菌体具有抗crispr (Acr)蛋白质,可以抑制CRISPR-Cas靶向。迄今为止,抗crispr基因主要是在噬菌体或噬菌体基因组中发现的。在这里,我们使用李斯特菌吖啶1基因作为标记,在厚壁菌门中发现了质粒上的acr位点和其他结合元素。在李斯特菌、肠球菌、链球菌和葡萄球菌基因组中发现的四种基因可以抑制ii型- a SpyCas9或SauCas9,因此被命名为acrIIA16-19。在粪肠球菌中,来自肠球菌偶联元件的抗crisprs增强了cas9靶向质粒的偶联,突出了Acrs在质粒传播中的作用。相互免疫共沉淀显示,每个Acr蛋白与Cas9相互作用,Cas9 - Acr复合物无法裂解DNA。Northern blotting表明,这些抗crisprs操纵单导RNA的长度、装载量或稳定性。与它们在细菌中的活性相对应,AcrIIA16和AcrIIA17对人类细胞中不同的Cas9蛋白(例如SpyCas9、SauCas9、SthCas9、NmeCas9和CjeCas9)提供了强大而高效的广谱抑制。这项工作集中分析了非噬菌体Acr蛋白,证明了在宽谱CRISPR-Cas9抑制的支持下,在水平基因转移中的作用。

 

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