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发布日期: Jul 17, 2019
资源类型: 13.95KB
资源性质: 科技论文
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偶联多种单链抗体免疫纳米微粒的制备方法及鉴定

偶联多种单链抗体免疫纳米微粒的制备方法及鉴定. 编号: YYHY007910 篇名: 偶联多种单链抗体免疫纳米微粒的制备方法及鉴定 作者: 邹金茂 李若梦 练国达 陈少杰 陈茵婷 黄开红 关键词: 纳米微粒 多种单链抗体 表面修饰 方法 机构: 中山大学孙逸仙纪念医院消化科 摘要: 目的建立一种多单链抗体修饰氧化铁纳米微粒的方法。方法利用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)及羧基(COOH group)修饰的氧化铁纳米微粒(Iron Oxide Nanoparticles,IONPs),以及抗MUC4、抗CEACAM6及抗CD44v6单链抗体(Single chain antibodies,scAbs),通过EDC/Sulfo-NHS交联剂将IONPs-PEG与3种scAbs进行交联,构建IONPs-PEG-multiscAbs复合物,再利用zeta粒度仪、透射电子显微镜(TEM)对IONPs-multiscAbs复合物进行表征,同时,在IONPs-PEG表面偶联荧光抗体,通过荧光强度测定其偶联效率;再鉴定复合物的抗原识别特异性及在放置1个月、6个月后评估复合物水溶液稳定性。结果偶联3种scAbs后,IONPs-PEG-multiscAbs复合物的平均粒径为(23.6±0.5)nm,粒径分布集中,zeta电位约(-17.3±06)mV;TEM显示粒径约10nm,荧光强度测定结果提示抗体偶联效率约为75%,细胞免疫荧光实验结果提示IONPs-PEG-multiscAbs复合物对高表达MUC4、CEACAM6及CD44v6分子的胰腺癌细胞BxPC-3具有特异性识别能力,证实该复合物具有良好的抗原识别特异性;在放置1个月、6个月后,偶联复合物的溶液分散性良好,放置6个月后平均粒径约(23.9±0.8)nm,zeta电位约(-17.6±0.4)mV,TEM拍照提示粒径约10nm,细胞免疫荧光提示复合物抗原识别特异性良好。结论本研究利用EDC/Sulfo-NHS交联剂组合,将3种单链抗体交联到PEG和羧基修饰的IONPs表面,构建IONPs-PEG-multiscAbs复合物,该方法偶联效率高,且复合物具有粒径小、分散性好、抗原识别特异性及水溶液稳定性好的特性。最新技术资料:· 纳米二氧化硅对轻质高强混凝土性能的影响研究2019.07.17· 镍/碳纳米管复合材料的合成及其吸附性能2019.07.17· 基于金纳米簇比色法对银离子的检测研究2019.07.17· Al-TiB2纳米晶薄膜中的反Hall-Petch效应2019.07.17· 高镁钙磷尾矿酸解制纳米级碳酸钙2019.07.17· 微纳米稀土化合物在高分子材料中的应用2019.07.17 .