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2016年第3期(发布时间: Mar 24, 2016 发布者:李阳)  下载: 2016年第3期.doc       全选  导出
1   2016-03-24 16:46:01.467 三种分子生物学诊断技术对结核病诊断价值的比较 (点击量:6)

结核病临床表现多样给临床诊断带来了极大困难。实验室检查对于结核病防治及诊断起着不可或缺的作用,包括以全菌体为靶标的病原微生物检测、以细菌核酸为靶标的分子生物学检测和以机体免疫反应及其产物为基础的检测方法,其中分子生物学检测是近些年发展起来的检测方法,具有快速、特异度及敏感度高等特点。基于此,来自西安市结核病胸部肿瘤医院的5名研究人员以于2014年4月至7月期间收集的378份西安市结核病胸部肿瘤医院收治的经病理确诊或细菌学确诊的肺结核患者痰标本为分析样本,采用实时荧光RNA恒温扩增检测技术(SAT)、分枝杆菌核酸检测(PCR-荧光探针,TB-NTM-PCR)和多色巢式荧光定量PCR(Xpert MTB/RIF)同时对同一份痰标本进行检测,并以MTB 960快速液体培养及痰直接抗酸染色镜检结果为金标准来分析SAT法、TB-NTM-PCR法及Xpert MTB/RIF法对MTB的检出率,比较3种检测方法的差异,评估其在临床诊断中的价值,其相关成果发表在《中华结核和呼吸杂志》2015年第38卷第9期。

研究发现,378份痰液标本中涂片阳性93例(24.6%,93/378),MTB 960快速液体培养阳性188例(49.7%,188/378),SSAT、TB-NTM-PCR及Xpert MTB/RIF法检测的总体阳性率分别为37.6%(142/378)、37.8%(143/378)和53.4%(202/378);痰抗酸染色镜检及MTB分离培养均为阳性(即涂阳培阳)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性率分别为84.6%(77/91)、91.2%(83/91)和96.7%(88/91),且基于x2检验的3种检测方法阳性率间差异有统计学意义(x2=8.014,P=0.0182);痰抗酸染色镜检阴性而MTB分离培养为阳性(即涂阴培阳)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性率分别为61.9%(60/97)、44.3%(43/97)和80.4%(78/97),且基于x2检验的3种检测方法阳性率间差异有统计学意义(x2=26.864,P<0.01);痰抗酸染色镜检阴性且MTB分离培养也为阴性(即涂阴培阴)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性率分别为1.6%(3/185)、6.5%(12/185)和16.8%(31/185),且基于x2检验的3种检测方法阳性率间差异有统计学意义(x2=29.061,P=0.018);痰抗酸染色镜检阳性而MTB分离培养为阴性(即涂阳培阴)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性例数分别为3/5、5/5及5/5例。此外,以MTB 960快速液体培养和痰直接抗酸染色涂片镜检为金标准,3种检测方法中xpert MTB/RIF法的敏感度(87.6%,163/186)及阴性预测值最高(88.5%,185/209)且漏诊率最低(12.4%,24/193);SAT法特异度(98.2%,214/218)及阳性预测值最高(97.2%,138/142)且误诊率最低(1.8%,4/218);以960药敏试验结果为金标准,Xpert MTB/RIF法耐药基因检测的正确率为95.48%(148/155),敏感度为95.5%(128/134),特异度为95.2%(20/21)。

综上所述,SAT、TB-NTM-PCR和Xpert MTB/RIF法对结核病诊断均具有良好的辅助作用,其中Xpert MTB/RIF法无论对涂阳或涂阴肺结核均具有良好的检出率。

2   2016-03-24 16:47:05.443 Xpert MTB/RIF检测技术在以胸腔积液为标本来诊断结核性胸膜炎方面的应用价值研究 (点击量:6)

近期,来自全印度医学科学研究所的5位研究人员合作开展了一项前瞻性研究。他们分别采用Xpert MTB/RIF检测法及BACTEC MGIT-960培养系统对从疑似结核性胸腔积液患者处采集到的162份胸腔积液标本进行检测,发现MGIT-960培养阳性标本43例(26.5%,43/162),Xpert MTB/RIF法检测阳性标本23例(14.2%,23/162);与MGIT-960培养结果相比,xpert MTB/RIF法的敏感度和特异度分别为54.8%和100%,其相关成果发表于Journal of Clinical Microbiology 2015年第53卷第11期。

3   2016-03-24 16:50:19.587 莫西沙星是治疗结核病一种有效、安全的候选药物:一项Meta分析 (点击量:5)

近期,来自苏州大学附属传染病医院及江苏省感染与免疫重点实验室的研究人员合作评估了将莫西沙星引入结核病治疗推荐方案的疗效和安全性,其相关成果于2015年10月16日发表在International Journal of Infectious Diseases上。

研究人员针对9项关于比较莫西沙星联合推荐治疗方案与单独采用推荐治疗方案在治疗结核病方面疗效的合格研究进行了Meta分析,发现在疗效分析方面,痰培养转化率的综合OR值为1.895[95%可信区间为1.355-2.651,p=0.000],说明相较于单独采用推荐治疗方案,莫西沙星联合推荐治疗方案的痰培养转化率要有所升高;复发率的综合OR值为0.516[95%可信区间为0.342-0.920,p=0.022],表明将莫西沙星加入推荐治疗方案能够降低治疗后结核病的复发率。在安全性分析方面,综合OR值估算约为1.001[95%可信区间为0.855-1.172,p=0.989],表明将莫西沙星加入推荐治疗方案来治疗结核病时不会增加不良反应的发生例数。

综上所述,将莫西沙星加入推荐治疗方案用于治疗非耐药结核病能够通过提升痰培养转化率及降低结核病复发率来改善临床疗效。

4   2016-03-24 16:51:47.117 乙硫异烟胺(ETH)和丙硫异烟胺(PTH)用于治疗儿童结核病的综述 (点击量:5)

近期,来自南非斯特伦布什大学和德国柏林夏里特大学医学院的研究人员综述了乙硫异烟胺和丙硫异烟胺在儿童结核病治疗方面的应用状况,其相关成果于2015年10月16日发表在Tuberculosis上。

研究者指出,硫代酰胺类药物乙硫异烟胺和丙硫异烟胺在临床研究中已被证明能够有效治疗成人和儿童结核性脑膜炎,且是多重耐药结核病治疗方案的重要组成部分。它们作为前药,可以通过分枝杆菌基因ethA对基因InhA(与异烟肼共享的治疗靶点)的抑制作用,在酶激活之后抑制结核杆菌分枝菌酸的合成。分枝杆菌inhA启动子区域发生突变可使细菌对ETH和异烟肼同时产生耐药性,而ethA基因发生突变则经常会使细菌对ETH或PTH产生单耐药性。尽管仍然缺乏最佳药效达标率方面的相关信息,但目前推荐儿童每日口服ETH或PTH 15-20mg/kg(每日最大剂量为1000mg)已被证明能够达到与成人相同的血药浓度,且这种血药浓度在成人群体中是有效的。在长期治疗过程中,成人及儿童群体中常见的不良反应为胃肠功能紊乱及甲状腺功能减退,但这些不良反应很少会危及生命,且在多数情况下没必要停止ETH治疗。未来还需要更多地探讨ETH和PTH对儿童结核病的治疗效果及毒副作用,并制定出适用于儿童的用药剂量。

5   2016-03-24 16:53:02.623 针对2型糖尿病合并潜伏结核感染患者体内由结核杆菌诱导的CD8+T细胞中细胞因子受损及细胞毒性标志物表达增强的研究 (点击量:1)

2型糖尿病是潜伏结核感染人群进展为活动性结核的一个危险因素。基于此,来自印度国家结核病研究所等机构的研究人员合作探讨了糖尿病对潜伏结核感染人群CD8+T细胞应答的影响,其相关成果于2015年10月20日发表在The Journal of Infectious Diseases上。

研究人员比较了结核潜伏感染合并糖尿病与不伴有糖尿病人群体内细胞因子和细胞毒性标志物的表达模式,发现结核潜伏感染合并糖尿病人群在结核杆菌抗原刺激作用下,其CD8+Th1、Th2和Th17细胞数量会下降,而CD8+T细胞表达的细胞毒性标志物数量则会增加,表明并发糖尿病会调控潜伏结核感染患者体内CD8+T细胞的功能。

6   2016-03-24 16:54:04.46 评价孟加拉国以社区为基础的耐药结核病治疗 (点击量:1)

由于在诊断和治疗方面存在困难,耐药结核病威胁着全球结核病的控制。以社区为基础的耐药结核病规范化治疗管理(cPMDT)能够降低结核病的治疗难度,但与该管理模型相关的数据还较为匮乏。基于此,来自美国CDC、孟加拉腹泻疾病国际研究中心、WHO孟加拉办事处等机构的研究人员试图评估了孟加拉国于2012及2013年发起的cPMDT,其相关成果于2015年10月22日发表在Tropical Medicine & International Health上。

在这项回顾性分析中,研究人员提取了与孟加拉国3个地区实施的超过6个月cPMDT涉及的所有患者相关的人口学、临床、微生物以及治疗效果方面的数据,并对通过非概率抽样得到的便利样本患者人群进行了访谈调查,用于了解他们对cPMDT的认识和看法。

研究人员通过对77名患者的病历进行审查发现,他们平均每隔1.35及1.36个月分别接收一次痰涂片和痰培养;在74名初始痰培养阳性患者中,70人(95%)的培养结果发生转变,其中有69人(93%)于第6个月之前的培养结果发生转变。在52名(68%)接收不良反应筛查的患者中,16人(21%)出现肌骨胳并发症、16人(21%)出现胃肠道不良反应、8人(10%)发生听力损失、4人(5%)出现与精神病相关的不良反应;相反地,在60名接受访谈的患者中,55人(92%)自述有过肌骨胳并发症、54人(90%)自述有过恶心症状、36人(60%)自述发生听力损失、36人(60%)自述出现精神障碍。

综上所述,孟加拉国实施的耐药结核病规范化治疗管理看似是可行且在临床上是有效的,但是对不良反应的监测不足还是会引起一些担忧。既然该项管理是在全国规模的基础上进行,应该不遗余力地优先进行不良反应监测。

7   2016-03-24 16:55:13.537 异烟肼预防性疗法对结核杆菌感染免疫应答的影响:一项开放性随机对照探索性研究 (点击量:1)

由于再次强调要在撒哈拉以南非洲地区实施异烟肼预防性疗法(IPT),近期来自乌干达马凯雷雷大学、伦敦卫生及热带医学学院、乌干达病毒研究所(UVRI)以及南非威特沃特斯兰德大学的研究人员联合分析了IPT对与家庭接触人群潜伏结核感染相关的免疫状况的影响,其相关成果于2015年10月22日发表在BMC Infectious Diseases上。

研究人员采用QuantiFERON®-TB Gold In-Tube(QFN)和结核菌素试验(TST)对结核确诊患者的家庭接触人群进行了与潜伏结核感染有关的检测,并将5岁以上且QFN和TST检测均为阳性的HIV阴性接触者随机分配至IPT组和每月随访组(或仅仅是随访而不给予治疗)。接着,以IPT组和6个月随访组家庭接触人群的QFN培养上清液为样本,采用液相芯片技术对结核杆菌特异性Th1、Th2、Th17和调节性细胞因子进行分析,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)对结核杆菌特异性IgG抗体浓度进行分析,并以第6个月末的细胞因子及抗体产生量为指标来评价IPT的影响作用。

研究发现,16%的家庭接触人群(47/291)被随机分配至IPT组(n=24)和非IPT组(n=23)。在对基线细胞因子或抗体反应进行校正以及卡介苗疤痕存在的情况下,与非IPT组相比,IPT组人群的结核杆菌特异性干扰素-γ[第6个月末的调整后平均差为-1488.6pg/ml,采用bootstrap法估计的95%可信区间(CI)为(-2682.5,-294.8),p值为0.01]和白介素-2[第6个月末的调整后平均差为-213.1pg/ml,采用bootstrap法估计的95%可信区间(CI)为(-419.2,-7.0),p值为0.04]的产生数量相对下降。同时IPT组人群的抗CFP10抗体水平相较于非IPT组也出现了类似的下降[调整后几何均值比为0.58,采用bootstrap法估计的95%可信区间(CI)为(0.35, 0.98),p值为0.04]。此外,还发现IPT对结核杆菌特异性Th2、Th17和调节性细胞因子应答及抗PPD和ESAT-6抗体浓度无影响。

综上所述,IPT能够减少Th1细胞因子的产生量并降低抗CFP10抗体浓度,既有可能是结核杆菌载荷量的下降,也有可能是异烟肼诱导T细胞发生凋亡的一个直接效应。总之,该项研究提示结核流行国家实行的异烟肼预防性疗法对人群或许具有保护性免疫作用。

8   2016-03-24 16:56:10.477 开发一种可在胞内筛选能够抑制人巨噬细胞内结核杆菌生长的新型化合物的方法 (点击量:1)

近期,来自英属哥伦比亚大学和葛兰素史克西班牙公司的研究人员合作开发了一种用于发现人巨噬细胞内抗结核活性化合物的细胞内高通量筛查技术,并对该技术的筛查效果进行了验证,其相关成果于2015年10月26日发表在Antimicrobial Agents and Chemotherapy上。

该技术包括两个部分,其一是以荧光素酶为基础的初步鉴定筛查,其二是以绿色荧光蛋白(GFP)为基础的二次分析。研究人员以标准抗结核药物和158种先前被确认的活性抗分枝杆菌化合物为分析样本来评估该筛查技术的鲁棒性,相关数据显示该技术是一种短时效、有价值的新型抗分枝杆菌化合物发现工具。

9   2016-03-24 16:56:55.983 采用吞线试验及粪便标本来诊断肺结核 (点击量:1)

Xpert MTB/RIF(MTB/RIF)技术推动了结核病诊断领域的发展,然而,考虑到年龄及HIV感染状况,针对10%-85%疑似肺结核人群无法提取其痰液进行检测,为此,来自美国贝勒医学院(休斯顿)、莱斯大学、斯坦福大学医学院以及休斯顿卫理公会医院研究所等机构的研究人员以13名疑似肺结核成年患者为分析样本,探讨了使用MTB/RIF技术分别检测粪便及吞线试验培养样本来诊断肺结核的可行性,其相关成果于2015年10月30日发表在International Journal of Infectious Diseases上。

结果显示,患者对吞线试验的耐受性良好,其Wong-Baker分值的中位数为2;采用MTB/RIF对吞线试验培养样本进行检测的敏感度和特异性均为100%,而传统的对痰培养标本进行MTB/RIF检测的敏感度为87.5%、特异性为100%。此外,在所有通过样本培养结果确诊为肺结核的患者粪便样本中均检测出结核杆菌DNA。

10   2016-03-24 16:58:12.297 核酸扩增检测法快速诊断胸膜结核的价值 (点击量:5)

胸膜结核是仅次于淋巴结结核的第2种常见肺外结核,目前对胸膜结核的诊断主要依赖于胸膜活检标本和(或)胸腔积液标本的传统病原微生物检测,包括胸腔积液理化检测、抗酸染色、培养鉴定、聚合酶链反应以及病理组织学检查等,然而这些诊断鉴定方法的敏感度及特异度较低且耗时耗力。而新型分子检测法核酸扩增(Xpert MTB/RIF)技术以全自动半巢式实时PCR技术为基础,以rpoB基因为靶基因可在2小时内同时检测MTB和利福平耐药,目前在肺结核诊断领域应用较为广泛,且其对肺结核的诊断价值也已逐步得到证实,因此进一步探讨其用于肺外结核诊断的可行性是很有必要的。为此,来自天津中医药大学第一附属医院及南昌大学第一附属医院的研究人员采用Xpert MTB/RIF检测了痰标本抗酸染色阴性可疑胸膜结核患者的胸膜活检组织及胸腔积液标本中的MTB并分析了利福平耐药情况,评价其在胸膜结核快速诊断中的应用价值,其相关成果发表于《中华结核和呼吸杂志》2015年第38卷第10期。

研究人员以香港大学深圳医院、南昌大学第一附属医院、江西省胸科医院及南昌大学第二附属医院2011年1月至2012年11月收治的126例胸膜结核临床疑似患者的胸膜活检组织及胸腔积液标本为样本,分别采用抗酸染色法、罗氏培养基培养法、全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏仪(BACTEC MGIT 960系统)培养法及Xpert MTB/RIF对其进行检测和对比分析,并采用SPSS 17.0对结果进行统计分析,以敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值作为诊断性能的评价指标。

研究发现以胸膜活检组织标本的传统分离培养结果(55例标本确诊为分枝杆菌阳性,71例确诊为阴性)为金标准,Xpert MTB/RIF法以胸膜活检组织作为标本的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为85.5%(47/55)、97.2%(69/71)、95.9%(47/49)和89.6%(69/77),以胸腔积液作为标本的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为43.6%(24/55)、98.6%(70/71)、96.0%(24/25)和69.3%(70/101);以BACTEC MGIT 960系统的药敏试验结果为参考标准,Xpert MTB/RIF法检测利福平药敏试验的利福平耐药率及敏感符合率分别为90.9%(9/10)和93.9%(31/33)。结合测序药敏结果,利福平耐药率及敏感符合率分别为90.9%(10/11)和96.9%(31/32)。

综上所述,Xpert MTB/RIF法与传统病原学检测方法相比具有敏感度及特异度高、检出时间短的优势,适用于对痰标本抗酸染色阴性的可疑胸膜结核患者胸膜结核的临床快速诊断,且胸膜活检组织标本较胸腔积液标本更适合Xpert MTB/RIF法对胸膜结核的准确特异快速诊断。