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2016年第9期(发布时间: Dec 1, 2016 发布者:李阳)  下载: 2016年第9期.doc       全选  导出
1   2016-12-01 16:46:57.103 结核病与循环microRNA之间的关系:一项基于中国人群的初步研究 (点击量:15)
结核病仍然是全球范围内致死率最高的传染性疾病之一。当前诊断工具的局限性已经严重减缓了消除结核的步伐。基于此,来自中国医学科学院病原生物学研究所、北京大学医学部公共卫生学院以及郑州市第六人民医院的研究人员合作分析了与结核病感染和进展有关的潜在的循环miRNA,其相关成果于2016年4月16日发表在Tuberculosis上。 研究将10名肺结核患者纳入试验组,13名潜伏性结核感染者纳入对照组,11名非结核感染者纳入健康对照组,首先采用安捷伦生产的人miRNA芯片对上述人群1887个miRNA的循环水平进行了评估,随后通过实时定量PCR对识别出的miRNA进行了验证,并在此基础之上进一步探讨了miRNA靶基因预测以及miRNA基因网络的构建。 研究采用芯片方法对任意两组研究人群之间不同水平的microRNA进行检测,最终识别出119个miRNA(Fold Change>2, p<0.01),之后通过实时定量PCR的验证筛选出10个最可能与结核有关的miRNA。研究虽未证实上述10个miRNA与结核感染状况有关,但证实与其它两组对照人群相比,肺结核患者的hsa-let-7b-5p和hsa-miR-30b-5p水平显著上调(p<0.01),且还预测胱天蛋白酶-3(Caspase-3)是这两个miRNA的一个共同靶基因。 综上所述,hsa-let-7b和hsa-miR-30b通过调节参与TLR-NF-kB介导的信号通路的靶基因,可能与结核发病存在一定的关联关系。
2   2016-12-01 16:50:37.907 耐多药肺结核化学治疗不良反应及处理 (点击量:7)
MDR-TB治疗方案中使用的二线抗结核药物有较高的毒性甚至致死致残性,其不良反应(adverse drug reaction,ADR)发生率较高,在一定程度上影响了治疗方案的实施。基于此,来自广州市胸科医院呼吸疾病国家重点实验室的研究人员回顾性分析了广州市胸科医院2008年11月至2013年7月间纳入第5轮全球基金MDR-TB治疗项目且完成24个月治疗疗程的96例患者的治疗过程,并对其ADR发生情况及处理对策进行了汇总,旨在为临床提供参考,其相关成果发表于《结核病与肺部健康杂志》2015年第4卷第4期。 研究采用的治疗方案为6 Km(Am)-Z-Lfx(Ofx) PAS(Cs)-Pto/18Z-Lfx(Ofx)-PAS(Cs)-Pto(Z:吡嗪酰胺;Km:卡那霉素;Am:阿米卡星;Cm:卷曲霉素;Lfx:左氧氟沙星;Ofx:氧氟沙星;PAS:对氨基水杨酸;Pto:丙硫异烟胺;Cs:环丝氨酸),替代药物根据患者个体情况相应替换,包括Mfx:莫西沙星;EMB:乙胺丁醇;Cm:卷曲霉素;Pa:对氨基水杨酸异烟肼;Clr:克拉霉素;Cfz:氯法齐明;Lzd:利奈唑胺。根据病历资料收集患者的一般情况、治疗方案、ADR(不同种类的反应分别计数)及其处理方法,包括对症观察、停药、减量、更改使用方法、替换药物、处理的结果等,并使用SPSS 17.0建立数据库对结果进行统计分析。 结果显示,83例患者(86.5%)发生ADR≥1次,共154例次,无ADR 13例(13.5%);治愈与治疗失败者ADR发生率分别是87.1%(54/62)和85.3%(29/34),差异无统计学意义(x2=0.06,P=0.806);在治疗0-1个月、2-6个月的ADR发生率最高,其中治愈者分别为40.7%(22/54)和46.3%(25/54),治疗失败者分别是34.5%(10/29)和55.2%(16/29),但各时间段ADR发生率的差异无统计学意义(x2=0.31,P=0.577和x2 =0.60,P=0.441);常见的ADR是胃肠道反应(恶心呕吐)、关节痛、头昏头痛和药物性肝损伤,发生率分别是50.0%(48/96)、25.0%(23/96)、13.5%(13/96)和15.6%(15/96);发生ADR的药物以Cfz、Pto、PAS、Clr、Lfx、Km、Z居多,分别是(括号内为使用例次)100%(7/7)、48.7%(39/80)、48.4%(31/64)、47.1%(8/17)、28.5%(20/70)、28.3%(17/60)、26.2%(22/84);107例次(69.5%)需停药处理,而替换药物无规律性,种类比较多,根据患者的个体情况而定。 综上所述,MDR-TB治疗的ADR发生率较高且种类繁杂,需采用有针对性的措施来进行规范处理。
3   2016-12-01 16:52:29.133 IL-36γ在宿主防御结核病中的作用研究 (点击量:0)
结核病仍然是全球范围内的一大“杀手”,但对与其相关的保护性免疫和免疫致病机制的了解还不够充分。目前已知在宿主防御结核病过程中针对IL-1和IL-18通路的调控是通过炎症小体复合物来完成,但尚不清楚宿主防御机制中针对IL-36γ(IL-1家族中一个新近被发现的成员)的调控及其免疫学意义。基于此,来自德国马克斯普朗克感染生物学研究所的学者们合作探讨了IL-36γ在宿主防御结核病中的作用,其相关成果于2016年4月18日发表在The Journal of infectious diseases上。 研究发现,结核杆菌对宿主巨噬细胞的感染分两个阶段来诱导IL-36γ的产生:在第一阶段,微生物配体通过触发Toll样受体(TLR)和MyD88依赖性通路引起IL-36γ的分泌;在第二阶段,内源性IL-1β和IL-18进一步扩增IL-36γ的合成。此外,还发现IL-36γ对结核杆菌的控制是通过IL-36γ诱导的抗菌肽以及IL-36受体依赖性结核杆菌生长限制作用来实现。 综上所述,该研究首次探讨了结核感染对促炎细胞因子IL-36γ的诱导和调控。
4   2016-12-01 16:54:08.553 抗菌肽LL-37、人β-防御素2和人β-防御素3在皮肤结核与结核疹病变中的表达 (点击量:0)
包括Cathelicidin LL-37、人β-防御素-2(HBD-2)和人β-防御素3(HBD-3)在内的抗菌肽既是参与固有免疫应答的重要元素,也参与调控宿主的适应性免疫。此外,他们在皮肤抵御结核杆菌的过程中也发挥着重要作用。基于此,来自北京大学人民医院及北京大学国际医院的研究人员以从3名皮肤结核患者、2名结核疹患者及10名健康个体处搜集的新鲜皮肤组织和石蜡包埋活检标本为分析样本,采用实时定量PCR检测了3名皮肤结核与2名结核疹患者病变部位LL-37、HBD-2和HBD-3 mRNA的表达状况,并采用免疫组化和免疫印迹法检测了蛋白质表达水平,其相关成果发表于《中华医学杂志(英文版)》2016年第129卷第6期。 结果显示,LL-37 mRNA及蛋白质在皮肤结核与结核疹病变中的表达水平与其在正常皮肤组织中的表达相似;与正常皮肤组织相比,HBD-2 mRNA在皮肤结核与结核疹病变中的表达呈上升趋势,而HBD-2蛋白质在皮肤结核病变中的表达则呈下降趋势;HBD-2蛋白质在结核疹病变中的表达水平与其在正常皮肤组织中的表达相似;HBD-3 mRNA及蛋白质在皮肤结核与结核疹病变中的表达水平与其在正常皮肤组织中的表达相似。 综上所述,HBD-2 mRNA及蛋白质和HBD-3 mRNA及蛋白质在皮肤结核病变中的表达与其在结核疹病变中的表达状况不一致。此外,由于研究选取的样本量较小,因此还需进一步分析皮肤结核与结核疹患者LL-37、HBD-2及HBD-3的表达情况及其相关的调控机制。
5   2016-12-01 16:55:16.007 结核分枝杆菌菌悬液光密度值与菌落计数的关联性 (点击量:2)
基于光密度值的结核杆菌定量方法具有简单、便捷、快速的优势,是一种相对实用的定量方法,但由于结核杆菌生长呈颗粒状、菌悬液制备方法、实验室检测仪器以及细菌培养方法等方面的差异,使得该方法缺乏统一的定量标准,因而需要探索一种简便可靠的方法以便于结 核杆菌的量化。基于此,来自复旦大学生命科学学院的5位研究人员合作建立了一种基于光密度值计算结核杆菌菌落数的可靠方法,其相关成果发表于《中国感染控制杂志》2016年第15卷第3期。 研究以结核菌株H37Ra为分析样本,分别采用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra菌悬液,并对二者的制备效果进行了比较。在菌悬液2倍梯度稀释后,分别测定各个稀释度菌悬液在600nm处的光密度值(OD600值),并分析了OD600值与稀释倍数之间的关系,用于确定最佳的菌悬液制备方法。此外,研究人员还探讨了OD600线性范围以及OD600值与CFU之间的关联关系。 结果显示,玻璃珠研磨结核杆菌5分钟可增加细菌的分散度,但分散细菌团块沉降率较大,需静置30分钟,而低频水浴超声处理结核杆菌后菌液分散度明显增加,且细菌悬液也较为均匀;CFU计数表明低频超声分散法菌落数比玻璃珠研磨法菌落数多,但两种方法制备的 菌悬液在同一稀释倍数下细菌数无数量级差异;两种方法制备的菌悬液吸光值均具有明显的梯度依赖性,其线性相关区间OD600值为0.1-0.6,且线性范围内OD600值与稀释倍数线性回归分析结果显示玻璃珠研磨法和低频超声法相关系数(R2)分别为0.98、1.00,均呈良好的相关性,其中低频超声法制备的菌悬液多次测定结果的重复性及稳定性要好于玻璃珠研磨法;对OD600值与CFU值进行线性回归分析显示玻璃珠研磨法和低频超声法回归方程分别是CFU=2.35×10000000×OD600+4.42×100000、CFU=3.26×10000000×OD600+6.89×100000。 综上所述,OD600值与CFU关联方法具有普遍适用性,而低频超声法可操作性和重复性好,二者结合可为实验室建立基于OD600值的结核杆菌定量标准提供重要参考。
6   2016-12-01 16:56:12.777 疫苗接种途径对非人灵长类结核病动物保护水平的影响作用 (点击量:0)
结核病仍然是全球范围内一个主要的健康问题,在2014年造成150万人死亡。为了对结核进行遏制,目前已有一些结核候选疫苗处于不同的测试阶段。为了明确接种途径在抗结核免疫应答和抵御结核过程中发挥的重要作用,来自匹兹堡大学医学院及丹麦国立血清研究所的学者们通过鼻内、皮下及雾化吸入3种途径对食蟹猴接种混合新型佐剂(CAF09)的蛋白亚单位疫苗(H56),其相关成果于2016年5月1日发表在The Journal of Immunology上。 研究采用细胞内细胞因子染色法对接种过程中及接种后支气管肺泡灌洗样本的免疫原性进行检测,采用血液和支气管肺泡灌洗样本对经结核杆菌感染的食蟹猴的免疫回忆应答状况进行评估,采用串行PET-CT扫描对感染过程中的肺部炎症进行追踪,采用尸检法对结核感染的严重程度进行评估。 结果显示,三种接种途径于接种后血液及支气管肺泡灌洗样本中产促炎性细胞因子的T细胞数量均升高,但通过雾化吸入方式接种的食蟹猴会在第三次接种后更早产生对气道的T细胞记忆功能;受结核杆菌感染后,PET-CT扫描发现经雾化吸入方式接种的食蟹猴发生炎症的次数要少于其它接种方式和未接种组;尸检发现,雾化吸入组与对照组相比,二者的大体病理和总细菌载荷量相似,但前者细菌清除率和肉芽肿中产T细胞的IFN-γ数量均高于后者。 综上所述,疫苗接种途径会影响宿主的免疫应答及疾病严重程度,其中雾化吸入方式的免疫效果更好,因此未来有必要进一步探讨雾化吸入结核疫苗的有益影响。
7   2016-12-01 16:59:29.4 用于抗结核治疗的外排泵抑制剂的研发现状 (点击量:0)
要点: 1. 外排泵抑制剂(EPIs)能够增强现有抗结核药物的疗效; 2. EPIs能够降低结核杆菌耐药性和耐受性; 3. 动物试验表明EPIs是有效的候选药物; 4. EPIs有望用于未来结核病的联合化疗。 对抗结核药物(尤其是一线药物)产生耐药性和耐受性已成为抗结核治疗面临的一个严重问题。抗菌药物通过细菌外排泵流出是耐药性产生的主要原因之一。附着于外排泵的EPIs通过抑制药物流出来提高药物疗效并降低耐药性。当前针对以结核杆菌外排泵为靶标的EPIs开展的研究既能够帮助理解结核杆菌耐药性,也能够明确潜在的药物靶点,对于指导新型抗结核药物的研发及最优联合用药方案的制定具有重要意义。 现阶段有许多潜在的EPIs处于在研状态,但尚无EPIs被用于临床抗结核治疗。基于此,来自解放军第309医院全军结核病研究所结核病诊疗新技术北京市重点实验室的吴雪琼教授等人对以结核杆菌外排泵为靶标的EPIs研发现状进行了概述,并对EPIs在临床上的潜在应用进行了讨论,其相关成果于2016年5月10日发表在International Journal of Antimicrobial Agents上。
8   2016-12-01 17:00:47.367 GyrA基因代偿性突变能够恢复结核杆菌对氟喹诺酮类药物的敏感性 (点击量:0)
结核杆菌对氟喹诺酮类药物产生耐受性主要是其DNA旋转酶(GyrA2B2)发生突变所致,其中最常见的置换发生于GyrA基因的第90和94点位。前期研究发现两个其GyrA基因发生A90E和D94N置换的结核杆菌临床多重耐药株对氟喹诺酮类药物(氧氟沙星,最小抑菌浓度≤2mg/L)敏感。基于此,来自巴黎索邦大学、法国巴斯德研究所、法国国家科学研究院以及巴黎狄德罗大学等机构的研究人员合作分析了上述两个菌株其它的GyrA基因位点置换(例如T80A和T80A?+?A90G)对氟喹诺酮类药物易感性的影响,其相关成果于2016年5月27日发表在Journal of Antimicrobial Chemotherapy上。 研究首先通过GyrA等位基因的位点特异性突变来生成感兴趣的突变体,其中野生及突变型结核菌DNA旋转酶亚基在大肠杆菌中过表达且得到纯化;然后分析了结核杆菌DNA超螺旋反应对氟喹诺酮类药物的体外敏感性。 结果显示,GyrA基因发生D94N和A90E置换的突变旋转酶复合体的IC50s要比野生型菌株的IC50s高3-36倍,而GyrA基因发生T80A?+?A90G?+?D94N和T80A?+?A90E置换的旋转酶的IC50s与野生型菌株的IC50s接近。 综上所述,通过研究与高水平氟喹诺酮类耐药性相关的基因位点置换发现T80A和A90G的置换能够恢复结核杆菌对氟喹诺酮类药物的敏感性,对GyrA进行测序分析能够校正线性探针技术对耐多药结核菌株的检测分类结果。
9   2016-12-01 17:01:48.567 莫西沙星能够改善对氧氟沙星产生耐药性的耐多药结核病患者的治疗效果 (点击量:2)
目前尚不清楚第4代氟喹诺酮类合成药物——莫西沙星用于对氧氟沙星产生耐药性的耐多药结核病患者是否能产生更好的治疗效果。基于此,来自国立台湾大学医学院附设医院、台湾卫生福利部台南胸腔医院的研究人员以2006年4月至2013年12月间在南台湾一家结核病转诊医院接受治疗的81名对氧氟沙星产生耐药性的耐多药结核病患者为分析对象,探讨了莫西沙星对氧氟沙星耐药型耐多药结核病患者治疗效果的影响,其相关成果于2016年5月23日发表在Antimicrobial Agents and Chemotherapy上。 研究最初纳入2511名经痰培养确诊为结核病的患者,而后从中筛选出325名(12.9%)耐多药结核患者,进而从中选出81名(24.9%)对氧氟沙星产生耐药性的耐多药结核病患者作为最终的研究对象。 结果显示,81名患者中,50名(61.7%)得到满意的治疗效果,而其余31名(38.3%)的治疗效果则不理想,其中治疗失败者25例(30.9%)、失访者2例(2.5%)、死亡者4例(4.9%); 接受莫西沙星治疗患者(尤其是对于40.7%的莫西沙星敏感型结核患者以及28.4%的对莫西沙星低耐药型结核患者而言)的治疗成功率要显著高于未接受莫西沙星者[77.3% vs. 43.2%,OR值为4.46,95%可信区间为1.710-11.646(P=0.002)];多元logistic回归分析表明,接受莫西沙星治疗是与治疗成功相关的唯一独立因素[校正OR值为6.54,95%可信区间为1.44-29.59(P=0.015)];gyrA基因第94位密码子突变是与莫西沙星高水平耐药有关的最常见突变(68.0%);多因素Cox比例风险回归分析表明,接受莫西沙星治疗也是与早期痰培养阴转有关的一个独立因素[风险比为3.12,95%可信区间为1.48-6.54(P=0.003)]。 综上所述,大多数对氧氟沙星产生耐药性的耐多药结核菌株对莫西沙星敏感或耐药水平较低,因此对氧氟沙星产生耐药性的耐多药结核病患者能够从莫西沙星治疗中获益。
10   2016-12-01 17:02:52.107 肺结核病变部位的缺氧及组织破坏研究 (点击量:0)
目前尚不清楚人结核病变部位是否缺氧及其是否会影响疾病的病理进程,而人结核病以宿主基质金属蛋白酶(MMPs),尤其是诸如基质金属蛋白酶-1(MMP-1)之类的胶原酶所介导的广泛性肺损伤为特征。基于此,来自伦敦帝国学院、剑桥大学临床医学院以及南安普顿大学等机构的研究人员采用以18F-硝基咪唑丙醇([18F]FMISO)为示踪剂的PET显像法以及免疫组化法对5名肺结核患者病灶处组织的缺氧状况进行了分析,并探讨了在常氧、缺氧、化学缺氧及siRNA抑制四种情况下原代人细胞培养模型中MMP的分泌调控状况,其相关成果于2016年5月31日发表在Thorax上。 结果显示,[18F]FMISO累积于结核实体病灶及周围的肺空洞处,表明在人体内出现严重的组织缺氧状况;对动态PET数据进行Patlak分析揭示了患者个体及患者间缺氧的异构水平;在结核杆菌感染的人巨噬细胞中,缺氧(1%血液氧分压)状况上调MMP-1基因表达幅度达170倍,进而促进了MMP-1分泌及酪蛋白的活性,而一种能够稳定转录因子-低氧诱导因子(HIF)1α的小分子抑制剂——二甲基草酰甘氨酸(DMOG)也能够类似地上调MMP-1;缺氧不影响分支杆菌的复制,且能够通过结核病调控的细胞间网络提高原代呼吸道上皮细胞中MMP-1的表达;HIF-1α和NF-κB能够在缺氧条件下调控MMP-1活性的上升。此外,研究还发现,结核菌感染甚至能够在常氧条件下促进HIF-1α的蓄积;在结核患者肺活检样本中,上皮样巨噬细胞及多核巨细胞能够表达HIF-1α; HIF-1α阻滞剂借助靶向siRNA能够抑制结核驱动的MMP-1基因表达和分泌。 综上所述,人结核病变部位缺氧严重而结核杆菌能够促进HIF-1α的蓄积,二者协同提高胶原酶的活性,进而会导致肺组织的破坏及空化。